Caracterización de aislamientos de Klebsiella pneumoniae doble productores de carbapenemasas en un hospital universitario / Phenotypic and genotypic characterization of double carbapenemase producing Klebsiella pneumoniaeisolates in a University Hospital

La emergencia de aislamientos de Klebsiella pneumoniaedoble productores de carbapenemasas (KPC y NDM) es una de las consecuencias de la pandemia causada por SARS-CoV-2 que ha causado un impacto significativo en las tasas de resistencia a los antimicrobianos en las infecciones intrahospitalarias por esta enterobacteria. Estos aislamientos representan un desafío para los servicios de salud, por su detección y caracterización y posterior tratamiento. En este trabajo se describen los aislamientos portadores de KPC y NDM recuperados durante 2022 aislados de distintas muestras clínicas de pacientes internados en un hospital universitario de la Ciudad de Buenos Aires, se los caracteriza fenotípicamente y genotípicamente como portadores de ambas carbapenemasas y se destaca la excelente actividad in vitro de la combinación ceftazidima-avibactam y aztreonam en el tratamiento de estas infecciones en donde las alternativas terapéuticas estarían limitadas a antibióticos no ß-lactámicos con porcentajes de resistencia que superan el 70%

The emergence of double-carbapenemase (KPC and NDM) producing Klebsiella pneumoniae isolates is one of the consequences derived from the SARS CoV-2 pandemic, which has caused significant impact on the antimicrobial resistance rates in hospital acquired infections. These isolates represent a real challenge for Health Services due to their difficult detection and characterization and subsequent treatment. In the present work we describe the double carbapenemase producing isolates recovered during the year 2022 from clinical samples belonging to hospitalized patients at a University Hospital in Buenos Aires city, we report their phenotypic and genotypic characterization and the excellent "in vitro" activity of the ceftazidime-avibactam-aztreonam combination in the treatment of infections in which the therapeutical options are restricted to non ß- lactamic antimicrobials which hold resistance rates higher than 70%

Analysis of colostrum IgA against bacteria involved in neonatal infections / Análise de IgA do colostro contra bactérias envolvidas em infecções neonatais

ABSTRACT Objective To describe e compare the specificity of IgA antibodies against bacteria extract of Klebsiella pneumoniae , Staphylococcus aureus , Escherichia coli , and Salmonella enteritidis . Methods Colostrum samples were aseptically collected in the first 12 hours after C-section delivery. The specificity of IgA against bacteria extracts was analyzed by the Western blot. Results The findings showed proteins of high molecular weight frequently detectable in the samples. S. aureus was the most frequently found bacterium in the samples (p<0.05). Approximately 93.8, 56.3, 62.5 and 60.4% of samples presented IgA reactive to S. aureus , K. pneumoniae , S. enteritidis, and E. coli, respectively. Roughly 40% of samples showed no IgA reactive to K. pneumoniae, S. enteritidis and E. coli . Conclusion Clinical evidence of the importance of breastfeeding for the immune protection of neonates was consistent with the observed immunological findings, since most samples showed IgA reactive against the species tested. The application and development of immunotherapies during pregnancy, focused on frequently detected antigens, could be an important tool to enhance the presence of IgA in colostrum.

RESUMO Objetivo Descrever e comparar a especificidade de anticorpos IgA de amostras de colostro contra extratos bacterianos de Klebsiella pneumoniae , Staphylococcus aureus , Escherichia coli e Salmonella enteritidis . Métodos As amostras de colostro foram coletadas assepticamente nas primeiras 12 horas após o nascimento por cesariana. A especificidade de IgA contra extratos de bactérias foi analisada por Western blot. Resultados Os achados mostraram proteínas de alto peso molecular frequentemente detectáveis nas amostras. S. aureus foi a bactéria mais encontrada nas amostras (p<0,05). Cerca de 93,8, 56,3, 62,5 e 60,4% das amostras apresentaram IgA reativa a S. aureus , K. pneumoniae , S. enteritidis e E. coli , respectivamente. Aproximadamente 40% das amostras não apresentaram IgA reativa contra K. pneumoniae , S. enteritidis e E. coli. Conclusão A evidência clínica da importância da amamentação para proteção imunológica ao recém-nascido foi consistente com os achados imunológicos observados, uma vez que a maioria das amostras mostrou IgA reativa contra as espécies testadas. A aplicação e o desenvolvimento de imunoterapias durante a gestação, focada nos antígenos frequentemente detectados, poderiam ser importantes instrumentos para aumentar a presença de IgA no colostro.

Vaccination with Klebsiella pneumoniae-derived extracellular vesicles protects against bacteria-induced lethality via both humoral and cellular immunity

The emergence of multidrug-resistant Klebsiella pneumoniae highlights the need to develop preventive measures to ameliorate Klebsiella infections. Bacteria-derived extracellular vesicles (EVs) are spherical nanometer-sized proteolipids enriched with outer membrane proteins. Gram-negative bacteria-derived EVs have gained interest for use as nonliving complex vaccines. In the present study, we evaluated whether K. pneumoniae-derived EVs confer protection against bacteria-induced lethality. K. pneumoniae-derived EVs isolated from in vitro bacterial culture supernatants induced innate immunity, including the upregulation of co-stimulatory molecule expression and proinflammatory mediator production. EV vaccination via the intraperitoneal route elicited EV-reactive antibodies and interferon-gamma-producing T-cell responses. Three vaccinations with the EVs prevented bacteria-induced lethality. As verified by sera and splenocytes adoptive transfer, the protective effect of EV vaccination was dependent on both humoral and cellular immunity. Taken together, these findings suggest that K. pneumoniae-derived EVs are a novel vaccine candidate against K. pneumoniae infections.

Frecuencia de aislamiento de Klebsiella pneumoniae productora de Beta-lacmasa de Espectro Extendido (BLEE) en muestras de hemocultivos de pacientes pediátricos internados en el Hospital Materno Infantil del Barrio San Pablo / Frequency of isolation of producing Klebsiella pneumoniae of Beta de Espectro Extendido (BLEE) in samples of hemocultures of paediatric patients committed in the Infantile Maternal Hospital of the District San Pablo

Estudio que tiene como objetivo determinar la frecuencia de aislamiento de cepas de klebsiella pneumoniae (KPN) productora de Beta-lactamosa de Espectro Extendido (BLEE) en muestras de pacientes pediátricos de un Hospital de Asunción y que fueron procesadas en el Laboratorio Central de Salud¨püblica entre enero a septiembre de 2006

Primer reporte del aislamiento de cepas de Klebsiella pneumonieas (KPN) resistentes a la carbapenems en Paraguay / First report of the isolation of pneumonieas stocks of Klebsiella (KPN) resistant to carbapenems in Paraguay

Reporte del aislamiento a partir de muestras clínicas de cepas de Klebsiella pneumonieas (KPN) resistentes a la carbapenems, que tiene como objetivo alertar a la comunidad sanitaria acerca de la presencia de las mismas en Paraguay

Incidencia de infecciones nosocomiales en la unidad de cuidados intensivos pediátrico Hospital Militar Dr. Carlos Arvelo: 2004-2005 / Incidence of infectious nosocomial in the unit of cares intensive pediatric Hospital Militar Dr. Carlos Arvelo: 2004-2005

Las infecciones nosocomiales representan un problema de morbilidad y mortalidad en las Unidades de Cuidados Intensivos Pediátricos. Este trabajo se realiza para conocer la prevalencia de gérmenes patógenos en la Unidad de Cuidados Intensivos Pediátricos del Hospital Militar "Dr. Carlos Arvelo". Se realiza un estudio retrospectivo entre enero de 2003 y enero de 2004 de 122 pacientes que ingresaron durante ese período, se tomaron cultivos de: sangre, secreción endotraqueal, orina, punta de catéteres, etc. Del total de pacientes, 57 presentaron cultivos positivos: hemocultivo 40,3 por ciento, secreción endotraqueal 29,8 por ciento, punta de catéter 15,7 por ciento, urocultivo 8,7 por ciento. Los gérmenes mayormente aislados fueron: bacilos gram negativos no fermentador en 26,3 por ciento, estafilococo coagulasa negativo 33,3 por ciento, Levaduras 15,7 por ciento, Pseudomona aeuruginosa 12,2 por ciento, cándida albicans 10,5 por ciento, enterobacterias 3,5 por ciento. Es importante resaltar que en nuestros casos hubo la presencia de bacterias productoras de batalactamasa como Escherichia coli en un 26 por ciento y Klebsiella pneumoniae en 7 por ciento. Al conocer la epidemiolog¡a de la Unidad obtenemos conocimientos acerca de sensibilidad, mecanismos de resistencia para definir el mejor control sobre estas infecciones y así lograr mejorar la morbilidad y mortalidad y disminuir la estadia de los pacientes.

CD4 and CD8 T cell response to the rHSP60 from Klebsiella pneumoniae in peripheral blood mononuclear cells from patients with ankylosing spondylitis / Respuesta de linfocitos T CD4 y CD8 contra la rHSP60 de Klebsiella pneumoniae en células mononucleares de sangre periférica de pacientes con espondilitis anquilosa

Objective. To determine the processing pathways used by peripheral blood mononuclear cells (PBMC) and present the rHSP60Kp, and the T cell subpopulations involved in the response, in patients with ankylosing spondylitis (AS) Methods. The lymphoproliferative response to the rHSP60Kp in PBMC from 14 HLA-B27 + AS patients and 15 B27 healthy controls was assessed by ³H-TdR incorporation. The processing pathways for the rHSP60Kp were analyzed by ³H-TdR incorporation in fresh PBMC from patients using homologous PBMC preincubated with the antigen and specific inhibitors: chloroquine, N-acetyl-L-leucil-L-leucil-L-nor-leucinal (LLnL) or brefeldin A (BFA), fixed with p-formaldehyde (fixed APC). The CD4+/CD8+ T cell subpopulation activated with the antigen was determined by three colours flow cytometry in PBMC from patients. Results. Eight out of fourteen patients showed positive lymphoproliferative responses to the rHSP60Kp while none of the healthy controls responded (p < 0.012). In five patients S.I. was above 4.0. In these patients lymphoproliferation was lower when chloroquine and LLnL was used and it became negative with BFA, indicating that both pathways are used. CD4+ and CD8+ T cells populations expressed CD69 when activated by the rHSP60Kp. Conclusions. Our results suggest that CD4 and CD8 T cells participate in the response to the rHSP60Kp in B27+ AS patients.

Objetivo.Determinar las vías utilizadas por las células mononucleares de sangre periférica (CMSP) de pacientes con espondilitis anquilosante para procesar a la rHSPGO de Klebsiella pneumoniae (rHSPGOKp) y las subpoblaciones de linfocitos T involucrados en la activación. Métodos. Se determinó la respuesta linfoproliferativa, por incorporación de ³H-TdR en CMSP, en presencia de la rHSPGOKp, en 14 pacientes con EA HLA-B27+y en 15 sujetos sanos HLA-B27-. La ruta de procesamiento y presentación de la rHSPGOKp se determinó por incorporación de ³H-TdR en las CMSP de los pacientes utilizando como células presentadoras a las CMSP homologas, preíncubadas con el antígeno y los inhibidores específicos: cloroquína, brefeldína A y N-acetil-L-leucil-L-leucil-L-nor-leucinal (LLnL), y fijadas con p-formaldehído. Se evaluaron las subpoblaciones de linfocitos T CD4+ y CD8+ que expresaron CD69, frente al antígeno, por citometría de flujo. Resultados. Ocho de los 14 pacientes y ninguno de los sujetos sanos, tuvo respuesta linfoproliferativa positiva (IE > 3.0) contra la rHSPGOKp (p < 0.012). En cinco de los pacientes el I.E. fue superior a 4.0. En estos pacientes la linfoproliferación disminuyó cuando se utilizó cloroquína y LLnL, y se hizo negativa cuando se utilizó BFA, lo que indica que ambas vías son empleadas. Las subpoblaciones de linfocitos T (CD4+ y CD8+) expresaron CD69 frente al antigeno. Conclusiones. Nuestros resultados sugieren que ambas poblaciones de linfocitos T: CD4+ y CD8+ participan en la respuesta a la rHSPGOKp.

Immunoprotective potential of polysaccharide-tetanus toxoid conjugate in Klebsiella pneumoniae induced lobar pneumonia in rats.

The polysaccharide (PS) derived from K. pneumoniae NCTC 5055 lipopolysaccharide (LPS) was covalently linked to tetanus toxoid by using carbodimide with adipic acid dihydrazide as a spacer molecule. The conjugate was found to be non-toxic and non-pyrogenic at 100 microg dose level. At a similar dose, the conjugate did not elicit any local skin reaction on intradermal preparatory injection in rabbits. The conjugate was immunoprotective as was evident from the decrease in relative colonization of bacteria in lungs of immunized rats as compared to the control animals. Immunization with the conjugate resulted in alveolar macrophage activation in terms of their ability to phagocytose bacteria in vitro.

Glicoprotéinas de Klebsiella pneumoniae como coadyuvantes en la prevención de infecciones recurrentes respiratorias en niños de 1 a 6 años de edad / The extract of Klebsiella pneumoniae can be used as a coadyuvant in the treatment of pediatric patients with recurrent respiratory infections

Antecedentes. Las infecciones recurrentes de las vías respiratorias altas y bajas representan los padecimientos más comunes de la edad pediátrica. Material y método. Estudio doble ciego, pareado y en paralelo. Se comparó la mejoría clínica y de laboratorio con un grupo de 44 pacientes control, a quienes se administró placebo, con un diagnóstico semejante, lo mismo que edades y distribución por sexo. Resultados. En el grupo de estudio, comparado con el de control (p<0.001 en todos los parámetros), a los 6, 9 y 12 meses posteriores al inicio del tratamiento hubo una disminución estadísticamente significativa del número de infecciones por año, duración de éstas y días de ausencia escolar. No hubo cambios estadísticamente significativos en las concentraciones de complemento hemolítico, C3, C4 e inmunoglobulinas IgA, IgG, IgM e IgE, cuando se compararon los valores basales y a los seis meses de iniciado el tratamiento. No se reportó reacción adversa a la administración oral de la glicoproteína de Klebsiella pneumoniae. Conclusión. Estos resultados sugieren que ésta puede usarse como coadyuvante en la prevención y tratamiento de pacientes con infecciones respiratorias bajas y altas recurrentes

Caracterización de una variante de Klebsiella pneumoniae resistente al suero humano normal, derivada de la cepa sensible / Characterization of a normal human serum resistent Klebsiella pneumoniae variant, derived from the original sensitive strain

Se aisló una variante de Klebsiella pneumonias resistente al suero normal a partir de la cepa sensible al mismo. Se utilizó al propio suero como agente de presión selectiva con el fin de eliminar la población sensible y enriquecer la población resistente. No se utilizaron agentes mutagénicos. Se caracterizó la variante, para lo cual se le determinó su resistencia al suero; se identificó mediante las pruebas bioquímicas particulares de la especie; se determinó su sensibilidad a dos bacteriófagos; se estableció su espectro de sensibilidad a diversos productos antimicrobianos y se hidrolizó su polisacárido capsular purificado con una despolimerasa asociada a un bacteriófago. En todos los experimentos se utilizó la cepa S como testigo. Los resultados indicaron que la variante fue resistente hasta un 30 por ciento de suero que fue la mayor concentración probada. Se encontró una pequeña diferencia en la morfología colonial con respecto a la cepa sensible. Los demás resultados fueron muy parecidos entre sí

Caracterización de la respuesta inmunológica humoral contra diversos componentes bacterianos de la Klebsiella rhinoscleromatis / Caracterization of humoral inmune response againts diverses bacterial components of Klebsiella rhinoscleromatis

El rinoescleroma es una infección crónica granulomatosa de las vías aéreas superiores, causada por la Klebsiella rhinoscleromatis. Esta es una bacteria intracelular obligada, oportunista, que infecta a individuos inmunocomprometidos, por esta razón, es endémica en áreas tropicales en poblaciones de muy bajo nivel socioeconómico. Para hacer el diagnóstico es necesario pensar en este padecimiento como posibilidad, ya que sus manifestaciones clínicas son muy polimorfas y por tanto,inespecíficas. En este trabajo se reportan los resultados de la evaluación de la respuesta humoral por la técnica de ELISA, en contra de la bacteria entera, así como polisacáridos y proteínas de membrana, en pacientes, parientes sanos y sujetos sanos no relacionados. Los títulos de anticuerpos contra las proteínas de membranas resultaron estadísticamente significativos. Esta prueba, además de ser una posible ayuda diagnóstica en la práctica diaria, es un primer intento para explorar la naturaleza de los antígenos reconocidos por los enfermos y por los sujetos sanos

Estudio inmunogenético de una familia con escleroma / Inmunogenetic study in family with scleroma

Se presenta una familia con 6 miembros afectados de escleroma. El estudio inmunogenético revela la existencia de un antígeno del complejo principal de histocompatibilidad (HLA) en todos ellos (DQ3), lo que implica inmunidad celular alterada. los niveles de inmunoglobulinas muestran un aumento de la IgG que puede corresponder a alguna alteración de la inmunidad humoral agregada relacionada, ya sea con factores extrínsecos o con factores intrínsecos no determinados por el complejo principal de histocompatibilidad (HLA).

Antibiotic and heavy metal resistence associated to plasmids in clinical isolates of Klebsiella pneumoniae in Chile

Resistência a antibióticos e metais pesados associada a plasmídio em isolados clínicos de Klebsiella de origem hospitalar no Chile. Isolados clínicos de Klebsiella pneumoniae de origem hospitalar apresentaram resistência múltipla para antibióticos e metais pesados associada a presença de plasmídio

Identificacion de las proteinas antigenicas de Klebsiella pneumoniae / Identification of antigenic proteins of klebsiella pneumoniae

La klebsiella pneumoniae es un microorganismo causante de multiples infecciones que cursan con una alta mortalidad. Es uno de los agentes nosocomiales mas frecuentes en Colombia y en otros paises sin que se haya podido controlar adecuadamente, debido a su virulencia y su alta resistencia a los antibioticos. A pesar de que sus componentes antigenicos polisacaridos y lipopolisacaridos han sido ampliamente estudiados, no ocurre asi con los antigenos proteicos. Esta investigacion describe la identificacion de proteinas antigenicas de klebsiella pneumoniae por medio de la PAGE y el inmunoblot. Se utilizaron cepas aisladas en muestras clinicas y sueros de pacientes de cuatro hospitales generales de Bogota. Se demostro la existencia de por lo menos 32 proteinas diferentes de klebsiella pneomoniae con pesos moleculares entre 11 y 210K, de las cuales alrededor de 18 se mostraron ser antigenicas. Se encontraron tres proteinas antigenicas de 167 K, 54 K y 39 K que son reconocidas por el sistema inmune humoral despues de que se ha superado la infeccion y estas podrian tener algun papel inmunogencio protector.

Vacination as an adjuvant to chemotherapy of Klebsiella pneumonial infection in the mouse

Nestes experimentos, estudou-se a atividade protetora da vacina produzida a partir da bactéria Klebsiella pneumoniae, em camundongos infectados com K. pneumoniae. A vacina foi administrada imediatamente após a injeçäo da bactéria, sendo portanto usada como adjuvante da quimioterapia. Os resultados mostram que a vacina, nestas circunstâncias, näo apresenta efeito protetor. Investigou-se a seguir o desenvolvimento da resposta imune tipo humoral nas condiçöes acima descritas, usando-se o método de formaçäo de placa de Jerne para detecçäo do número de células formadoras de anticorpos